STUDY OF THE IXODES PINCERS IN THE VILLAGE OF ROZHDESTVENO

Cover Page

Cite item

Full Text

Abstract

In this work we analized information about species compozitions of ixodes pincers in the village of Rozhdestveno, as well as the degree of infection of these individuals. There are 2 types of Ixodes pincers living in this territory: taiga and dog ticks. There are 2 types of Ixodes pincers living in this territory: taiga and dog ticks. The frequency of Ixodes ricinus -18 %, Ixodes persulcatus- 82 %. Studied the degree of infection of these individuals, which is 13 %. In this work, we have established occurrence in grassy biotope is higher than in deciduous forest. As well as, we have estabilished two peaks of activity: the end of May and the beginning of August.

Full Text

Исследование клещей рода Ixodes, явля- причине проникновения вируса в половые ющихся переносчиками и хранителями забо- железы, в дальнейшем, зараженным клещом леваний трансмиссивной природы, характе- продуцируются уже инфицированные особи. ризующихся природной очаговостью, - наи- Передача вируса окончательному хозяину важнейшая проблема, не только вирусологии, происходит при укусе клещом, когда осу- но и экологии. В нашей стране производятся ществляется контакт зараженной слюны па- многочисленные исследования по изучению разитической особи и здоровой крови хозя- и анализу видового состава популяций иксо- ина [2; 3]. довых клещей, их биологических, экологиче- Работниками научной сферы разрабо- ских и этологических особенностей. Изуче- таны эффективные меры по предотвращению ние данного вопроса становится еще значи- распространения энцефалита. Значительное мее при учете того факта, что клещевой ви- количество времени было потрачено на два русный энцефалит - острое инфекционное главных направления защиты от клещевых вирусное заболевание, по которому Самар- инфекций, первое - истребительное, подразу- ская область занимает одно из первых мест по мевающее полное уничтожение клещей ака- заболеваемости данным вирусом [1]. рицидными производными, и профилактиче- ское, подразумевающее иммунологическую Материалы и методы защиту населения. К главным задачам по- Как известно, подавляющее число пред- следнего направления можно отнести недопу- ставителей семейства иксодовых переносят стимость перехода вируса к человеку и разра- опасные для жизни человека и животных ин- ботку способов предотвращения круговорота фекции. При этом, по данным, накопленным возбудителей в природе. Обработка акарици- многими исследователями, вирус клещу пере- дами основных прокормителей клещей - мле- дается так: первоначально, вирус переносится копитающих и птиц осуществляется специ- через поступающую кровь в желудок клеще- фическими организациями [4]. вой особи, далее происходит заражение всех Методика иммуноферментного выяв- внутренних органов, концентрирование ви- ления антигена вируса клещевого энцефа- руса в слюнных и половых железах. По лита. Метод определения антигена основан © Житяева И. Э., 2019. Житяева Ирина Эдуардовна (irzhit63@yandex.ru), магистрант биологического факультета Самарского университета 443086, Россия, г. Самара, Московское шоссе, 34. 66 Биология на твёрдофазном иммуноферментном ана- пропорциональном их объёму, но не менее лизе (ИФА). Во время первой инкубации 40 мкл. происходит связывание антигена ВКЭ (ви- 5. Тщательно перемешать содержимое рус клещевого энцефалита), содержащегося пробирки на шейкере (5-10 сек) до получения в исследуемых образцах, с иммобилизован- однородной суспензии. ными на поверхности лунок планшета мо- 6. Суспензию центрифугировать в тече- ноклональными антителами и образование ние 5 мин. Полученные супернатанты ис- комплекса «антиген-антитело». Образовав- пользовать для анализа [3-5]. шийся комплекс выявляется с помощью Проведение иммуноферментного ана- конъюгата моноклональных антител к ВКЭ лиза. Внести в две лунки, например, А-1 и с пероксидазой хрена, который добавляется В-1, по 100 мкл отрицательного контрольного одновременно с исследуемыми образцами. образца и в одну лунку, например, С-1, Во время второй инкубации с раствором 100 мкл положительного контрольного об- тетраметилбензидина происходит окраши- разца. В остальные лунки внести по 100 мкл вание раствора в лунках, содержащих ком- используемых образцов (время внесения об- плексы, антиген-антитело. Степень окраски разцов не должно превышать 10 мин. при ис- пропорциональна концентрации антигена пользовании всех лунок). ВКЭ в анализируемых образцах. После из- Во все лунки внести по 50 мкл конъ- мерения оптической плотности (ОП) рас- югата. Отрезать пленку требуемого размера. твора в лунках на основании рассчитанного Стрипы закрыть, плотно прижав пленкой. Ин- значения ОПкрит анализируемые образцы кубировать 3 ч. при температуре (25±1) °С в оцениваются, как положительные или отри- термошейкере с интенсивностью перемеши- цательные [5]. вания 400 об/мин или 18-29 ч. при темпера- Подготовка исследуемых образцов. туре (25±1) °С во влажной камере. Для проведения анализа следует ис- Внести во все лунки по 100 мкл рас- пользовать целые экземпляры клещей, так твора ТМБ и инкубировать в темноте в тече- как результаты анализа фрагментов могут ние 25 мин. при комнатной температуре. За- быть недостоверными. тем внести во все лунки по 100 мкл стоп-реа- 1. Клеща обмыть 70 % раствором эти- гента. лового спирта и высушить фильтровальной Значение ОПср К¯ не должно превы- бумагой. Поместить в пробирку типа «Эппен- шать 0,2. Значение оптической плотности в дорф» и плотно закрыть. лунках с положительным контрольным об- 2. Пробирку с клещем поместить в ем- разцом должно быть не менее 0,8. На основа- кость с жидким азотом и заморозить в тече- нии полученных данных вычислить критиче- ние 20 мин. ОП по формуле: ОПкрит = ское значение 3. Замороженного клеща осторожно и ОПср К¯ + 0,2. Результат анализа считают по- тщательно растереть в гомогенизаторе или в ложительным, если ОПобр ≥ ОПкрит, где пробирке стеклянной или металлической па- ОПобр - оптическая плотность в лунке с ис- лочкой. Для каждого образца клеща следует следуемым образцов [5]. использовать отдельный пестик во избежание контаминации. При многократном использо- Результаты и их обсуждение вании палочек их следует выдержать в тече- Исследования иксодовых клещей про- нии 30 мин в 70 % растворе этилового спирта, водились в 2015 и 2016 гг., рассмотрим сна- затем промыть дистиллированной водой и чала данные за 2015 год. высушить. Сбор объекта исследования проводился 4. В пробирку с растертым клещем, не 7 раз, один раз в каждый месяц в период май - вынимая пестик, добавить 220 мкл раствора август. Данный период обусловлен тем, что для разведения образцов (РРО). Аккуратно по данным исследователей иксодовых кле- ополоснув пестик в содержимом пробирки, щей, встречаемость как заражённых, так и не вынуть его и поместить в дезинфицирующий заражённых особей была выше. раствор. Для напитавшихся клещей больших На основе результатов был составлен размеров РРО вносить в количестве график (см. рис. 1). Вестник молодых учёных и специалистов Самарского университета. 2019. № 1 (14) 67 20 18 18 15 15 16 Количество клещей, экз. 14 12 12 12 10 8 7 7 8 5 5 6 3 4 2 1 2 0 0 27.05 7.06 25.06 6.07 28.07 3.08 25.08 Дни Опушка Тропа Рис. 1. Сезонная динамика численности клещей в разных биотопах за 2015 г. 16 14 14 14 12 11 10 Количество клещей, экз. 10 8 6 5 4 4 4 3 2 2 2 2 1 0 0 0 27 мая 7 июня 25 июня 6 июля 28 июля 3 августа 25 августа Дни Таежный Собачий Рис. 2. Видовой состав иксодовых клещей на опушке за 2015 г. 10 9 9 8 7 6 Количество клещей, экз. 6 5 5 5 4 4 4 3 3 2 2 2 1 1 0 0 0 0 0 27 мая 7 июня 25 июня 6 июля 28 июля 3 августа 25 августа Дни Таежный Собачий Рис. 3. Видовой состав иксодовых клещей на тропе за 2015 г. 68 Биология Позднее в лабораторных условиях мы На основе полученных результатов был провели определение видового состава со- составлен график (см. рис. 4). бранных клещей. Было выяснено, что в пре- После каждого сбора клещи, обнару- делах исследуемого района (с. Рождественно) женные на опушке и вдоль тропы были поме- обитает 2 вида иксодовых клещей: собачий - щены в 2 стеклянные баночки, в которых I. ricinus и таёжный - и I. рersulcatus. находились смоченные ватные диски (т.к. это При изучении полученных образцов, на влаголюбивые паукообразные) и в течение основе полученных данных был составлен часа были доставлены в лабораторию для график (см. рис. 2 и рис. 3). определения видового состава с помощью би- Исследования иксодовых клещей в 2016 нокуляра. году. Сбор объекта исследования проводился При изучении полученных образцов, на на основе опыта отбора образцов иксодовых основе полученных данных были составлены клещей в предыдущие годы. графики (см. рис. 5 и 6). 14 12 12 Количество клещей, экз. 10 10 9 8 8 6 6 6 5 4 2 2 1 1 1 0 0 0 0 30.05 6.06 27.06 4.07 29.07 5.08 26.08 Дни Тропа Опушка Рис. 4. Сезонная динамика численности клещей в разных биотопах за 2016 г. 12 10 10 9 Количество клещей, экз. 8 8 6 6 4 2 2 2 1 1 0 0 0 0 0 0 0 30 мая 6 июня 27 июня 4 июля 29 июля 5 августа 26 августа Дни Таежный Собачий Рис. 5. Видовой состав иксодовых клещей в 2016 году на опушке Вестник молодых учёных и специалистов Самарского университета. 2019. № 1 (14) 69 7 6 6 5 Количество клещей, экз. 4 4 4 3 2 2 2 1 1 1 1 1 0 0 0 0 0 0 30 мая 6 июня 27 июня 4 июля 29 июля 5 августа 26 августа Дата Таежный Собачий Рис. 6. Видовой состав иксодовых клещей в 2016 году на тропе 3 Количество клещей, экз. 2 2 1 1 0 0 0 0 0 0 30.05 6.06 27.06 4.07 29.07 5.08 26.08 Дни Рис. 7. Число заражённых клещей на опушке в 2016 году Как выяснилось при анализе данных, связи с этим мы можем утверждать, что численность клещей коррелирует с погод- встречаемость клещей зависит не только от ными условиями и сезонностью. природных условий, но и от цикла развития. Встречаемость клещей в биотопе на Все собранные особи в 2016 году были опушке леса более частая, т. к. иксодовые проверены на зараженность вирусом энцефа- клещи достаточно влаголюбивы и избегают лита с помощью иммуно-ферментного ана- прямых солнечных лучей, а здесь вблизи рас- лиза. Данный вирус был обнаружен у клещей положен водоем, куда, возможно, на водопой собранных 30 мая, 5 августа и 26 августа. 30 приходят домашние животные. На тропе, мая: на тропе -1 таёжный клещ , на идущей через лиственный лес, присутствует опушке - 1 собачий клещ. 5 августа: на повышенная освещенность солнечными лу- тропе - 1 таёжный клещ, на опушке - 2 та- чами и влажность воздуха более низкая, а ёжных клеща. 26 августа: на тропе - 3 таёж- также почва более уплотнена. ных клеща. На основе данных был составлен Два пика активности иксодовых клещей график (см. рис. 7 и рис. 8). наблюдались в конце мая и начале августа. В 70 Биология 3 3 Количество клещей, экз. 2 1 1 1 0 0 0 0 0 30.05 6.06 27.06 4.07 29.07 5.08 26.08 Дни Рис. 8. Число заражённых клещей на тропе в 2016 году Заключение Заражённость из числа собранных образцов На территории села Рождествено выяв- составляет 13 %. лено обитание двух видов иксодовых клещей: собачий (Ixodes ricinus) и таёжный (Ixodes Литература persulcatus). Встречаемость таёжного клеща в 1. Валицкая А. В. Биологические осо- 2015 и 2016 году составляет 82 %, а собачь- бенности клеща Ixodes persulcatus P. Sch., его - 18 %. способствующие активизации природных В 2015 году наибольшая численность очагов клещевого энцефалита в Тюменской иксодовых клещей зарегистрирована в травя- области: автореф. дис…. канд. биол. наук. нистом биотопе на опушке леса (среднее зна- Тюмень, 2003. 13 с. чение - 10 экз./150 м), а в лиственном лесу - 2. Вильегас З. А. Экологические осо- 6 экз./150 м. бенности и паразитиформные клещи мелких В 2016 г. наибольшая численность иксо- млекопитающих (насекомоядных и грызунов) довых клещей зарегистрирована в травяни- белорусского Полесья: автореф. дис…. канд. стом биотопе на опушке леса (среднее значе- биол. наук. Минск, 1998. 22 с. ние - 6 экз./150 м), а в лиственном лесу - 3. Томилова Т. Инфекции, передавае- 3 экз./150 м. Максимальная активность кле- мые иксодовыми клещами // Российская охот- щей в данном районе отмечена в конце мая и ничья газета. № 33. 1999. С. 21-27. начале августа, т.е. наблюдается два пика чис- 4. Михайленко А. Г. Мелкие млекопи- ленности. тающие и иксодовые клещи в природных оча- В 2015 году количество клещей было гах туляремии и некоторых зоонозов Мол- больше (113 шт), чем в 2016 году (61), это довы: автореф. дис…. канд. биол. наук. Ки- связано с тем, что в 2014 году зима насту- шинев, 1993. 17 с. пила быстро (резко) и у клещей не было вре- 5. Алешковская Е. С. Клинико-лабора- мени для подготовки к зиме, и также это торная характеристика иксодового клещевого связано с тем, что зима в 2014-2015 году боррелиоза и энцефалита в Центральном ре- была более холодная, чем в 2015-2016. гионе России. М.: Наука, 2009. 251 с. Вестник молодых учёных и специалистов Самарского университета. 2019. № 1 (14) 71
×

About the authors

Irina Eduardovna Zhityaeva

Samara University

Email: irzhit63@yandex.ru
Russia, Samara

References

  1. Валицкая А. В. Биологические особенности клеща Ixodes persulcatus P. Sch., способствующие активизации природных очагов клещевого энцефалита в Тюменской области: автореф. дис…. канд. биол. наук. Тюмень, 2003. 13 с.
  2. Вильегас З. А. Экологические особенности и паразитиформные клещи мелких млекопитающих (насекомоядных и грызунов) белорусского Полесья: автореф. дис…. канд. биол. наук. Минск, 1998. 22 с.
  3. Томилова Т. Инфекции, передаваемые иксодовыми клещами // Российская охотничья газета. № 33. 1999. С. 21-27.
  4. Михайленко А. Г. Мелкие млекопитающие и иксодовые клещи в природных очагах туляремии и некоторых зоонозов Молдовы: автореф. дис…. канд. биол. наук. Кишинев, 1993. 17 с.
  5. Алешковская Е. С. Клинико-лабораторная характеристика иксодового клещевого боррелиоза и энцефалита в Центральном регионе России. М.: Наука, 2009. 251 с.

Copyright (c) 2019 Proceedings of young scientists and specialists of the Samara University

Creative Commons License
This work is licensed under a Creative Commons Attribution-ShareAlike 4.0 International License.

This website uses cookies

You consent to our cookies if you continue to use our website.

About Cookies